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抗菌罗红霉素的生产工艺了解
发布时间:2018-09-25   点击次数:45次
       抗菌罗红霉素干混悬剂为半合成的14元环大环内脂类抗生素,适用于化脓性链球菌引起的咽炎及扁桃体炎,敏感菌所致的鼻窦炙、中耳炎、急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作,肺炎支原体或肺炎衣原体所致的肺炎,沙眼衣原体引起的尿道炎和宫颈炎,敏感细菌引起的皮肤软组织感染。本实验采用薄膜过滤法,用含5%乙醇的0.1%无菌蛋白胨溶液冲洗滤膜,对该品种进行微生物限度检查,各控制菌回收率在70%以上,表明该方法可行。
  1 仪器与试药
  1.1 仪器:HTY-2000集菌仪、集菌培养器(孔径为0.45μm),HH.BII.420电热恒温培养箱、LRH-250A生化培养箱、Sartorius BS 2002S电子天平、SA-1480-Ⅱ净化工作台。
  1.2 培养基:营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、胆盐乳糖培养基、营养肉汤培养基、MUG培养基,均购于中检所。
  1.3 菌种:枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501、金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003、大肠埃希菌CMCC(B)44102、白色念珠菌CMCC(F)98001、黑曲霉CMCC(F)98003(以上菌株均为第三代),均购于中检所。
  1.4 菌液制备
  1.4.1 取经30℃~35℃培养18~24小时的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌营养肉汤培养液1ml,加0.9%无菌氯化钠至每ml含菌50~100cfu。
  1.4.2 取经23℃~28℃培养24~48小时的白色念珠菌改良马丁培养液1ml,加0.9%无菌氯化钠至每ml含菌50~100cfu。
  1.4.3 取经23℃~28℃培养5~7天的黑曲霉改良马丁营养琼脂斜面,用0.9%无菌氯化钠3~5ml将孢子洗脱,加0.9%无菌氯化钠至每ml含菌50~100cfu
  2.实验方法
  2.1 细菌霉菌及酵母菌检查方法的验证
  2.1.1 供试液的制备 取供试品10g,加pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液至100g,作为1:10的供试液。
  2.1.2 方法验证过程 验证试验进行3次独立的平行试验,并分别计算各试验菌的回收率。
  2.1.2.1 实验组 取1:10供试液1ml,加入50ml含5%乙醇的0.1%无菌蛋白胨溶液中,摇匀,立刻过滤,滤膜用500ml含5%乙醇的0.1%无菌蛋白胨溶液冲洗后,用注射器加入菌液1ml,滤干,取滤膜培养。每株菌株(大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉)各做1份试验。
  2.1.2.2 菌液组 取菌液1ml加入平皿中,立刻加入相应的琼脂,各菌株做2份平行试验。
  2.1.2.3 供试品对照组 按试验组的方法不加菌液,测定供试品的本底菌数。
  2.1.2.4 稀释剂对照组 取上述菌液(枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉)各1ml,加入50ml含5%乙醇的0.1%无菌蛋白胨溶液中,滤过,滤膜用500ml含5%乙醇的0.1%无菌蛋白胨溶液分5次冲洗后,滤干。取滤膜培养。每株菌株(大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉)各做1份试验。

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